天天伊人-天天伊人网-天天影视欧美综合在线观看-天天影视色-天天影视色香欲综合网 寡妇

熱門搜索: CH-3A玻璃瓶壁厚底厚測定儀 CH-3A玻璃瓶壁厚測定儀 DTS-II可油水分離電脫水儀 KSD-VI活性炭填裝密度測試儀 KSD-VI活性炭裝填密度測試儀 CH-3A霍爾效應測試儀 CH-3A磁性玻璃瓶測厚儀 DTS-6可控溫石油含水電脫分析儀 DTS-6可定時石油含水電脫分析儀 CH-3A霍爾效應測厚儀 LW-4D水泥桿便攜式伺服加載試驗裝置 LH-4荷載力學儀擾度計 LH-4電桿荷載撓度測試儀帶支架 LW-4無線電桿荷載撓度儀 LW-4無線電桿荷載撓度測試儀 SBQ81834藥物粘度測試儀

PRODUCT CLASSIFICATION

產品分類

技術文章/ Technical Articles

您的位置:首頁  /  技術文章  /  高速離心機分離血清脂蛋白的原理與步驟

高速離心機分離血清脂蛋白的原理與步驟

更新時間:2013-03-14      瀏覽次數:2088

用電泳法分離含載脂蛋白較高的組份(HDL,VHDL)比較成功,而離心分離法則適合用于各種密度的血清脂蛋白分離。
  
  血清脂蛋白是由血液中脂質與某些特異的蛋白質組成的一類不均一的復合物。因其所含脂與載脂蛋白的比例不同,其密度范圍在0.96g/ml或更低至1.21g/ml之間。紙電泳中顯示四條帶即:乳密顆粒,極低密度脂蛋白,低密度脂蛋白,高密度脂蛋白。每種脂蛋白還可以分為更多的亞組分。
  
  一.梯度材料:血清脂蛋白密度較低,常用的梯度材料為Nacl,NaI,Kbr,KI等,常用的緩沖劑為ED。
  
  二.預分離:
  
  1.血細胞與血清分離:
  
  離心參數:全血,角轉頭,3,000rpm×20min
  
  結果:沉淀為血細胞,上部為血清。
  
  2.乳糜粒分離:禁食12小時以上人血漿中乳糜粒含量極少,已進食者因其血漿含乳糜粒高,應先離心去除乳糜粒。
  
  離心參數:4×10(g×min),10°C.各種轉頭轉速均可。
  
  梯度液配置:離心管下部3/4容積加血漿,上部1/4容積加0。5MnaCl 0.3MEDTA,ph7.4
  
  結果:乳糜粒上浮,吸出。
  
  3.血清蛋白分離:除去球蛋白,白蛋白及其它蛋白質。
  
  離心參數:(2。5-3)×10(g×hr),各種轉頭均可。如角轉頭70,000rpm×6hrs,10°C
  
  配置:管容量1/3為血清,2/3為1。31g/ml,NaCl NaBr,攪拌后終密度為1。21g/ml
  
  結果:管上部1/6容積為血清脂蛋白,下部5/6為其它蛋白。
  
  三.方法:
  
  1.順序浮選法:
  
  a)超速法:zui早使用的方法,4000rpm×24hrs×3次,10°CNaCl NaBr梯度按1。006,1。063,1。21順序浮選,每次在管上部取出不同密度之
  
  脂蛋白。操作簡單,分辨率高,得率高,費時,成本高。
  
  b)超高速法:100,000rpm×2.5hrs×2次,10°C,100,000rpm×4hrs×1次,NaCl KBr EDTA梯度按不含密度浮選出VLDL,LDL,HDL
  
  2.單次離心法:
  
  a)單次水平分離
  
  用zui高轉速為25,000~28,000rpm,6×40ml甩平轉頭以1.006g/mlNaCl液及1。35g/ml(NaCl KBr EDTA)液配置成從1。006至1。21的8層不
  
  連續階梯度,zui下部用血清與KBr配成1。25g/ml樣品液,25,000rpm×4hrs,4oC一次得到VLDL,LDL,HDL不同層區帶。
  
  用zui高轉速為40,000rpm,6×13ml甩平轉頭,40,000rpm×24hrs,20°C,不連續KBr梯度1.006~1.21g/ml,細長管,分層清晰,回收率
  
  高,離心時間長
  
  b)單次垂直管分離:
  
  NaCl/KBr或NaCl/NaBr不連續梯度單管容量從5ml到40ml,轉速從50,000rpm~80,000rpm,離心(0。5-3)hrs,下層用KBr或(NaBr)將血清調至1
  
  。3g/ml上層用1.006g/ml,NaCl液,10°C-20°C,增加,減速一次分出。NaCl/Sucrose不連續梯度下層為48%W/WSucrose,中層血清在4MnaCl
  
  中,上層為0。67MNaCl 0.05%EDTA,離心參數同上,時間較長。
  
  c)區帶轉頭大容量分離:
  
  離心參數:區帶轉頭,zui高轉速30,000~48,000rpm,容量從650ml~1900ml,每次可分離血清50-150ml,低速加樣及卸載,分離轉速:大轉頭
  
 ?。?5,000-28,000rpm)×24hrs,小轉頭(30,000-38,000rpm)×1hrs,10°C-20°C
  
  梯度液:NaCl NaBr或KBr EDTA不連續或線性梯度,樣品在zui大密度層,近轉頭核心處用純水做隔離層,分離室zui外部用高密度NaCl/KBr或
  
  NaCl/NaBr作緩沖層。
  
  收集:泵出后依此經帶流動地的紫外檢測儀檢測,自動部分收集器收集。
 

 

                                                   文章來源:北京綠野創能機電設備有限公司

微信掃一掃

郵箱:lvyechuangneng@163.com

傳真:

地址:北京市門頭溝區齋堂鎮LZTC005號

Copyright © 2025 北京綠野創能機電設備有限公司版權所有   備案號:京ICP備11038638號-1    技術支持:化工儀器網

TEL:13661171160

掃碼加微信
主站蜘蛛池模板: 国产精品日本一区二区不卡视频 | 黄色体验区 | 日本黄色免费观看 | 国产福利在线观看永久视频 | 99免费视频 | 可以直接看的黄色网址 | 黄色一级小视频 | 国产精品午夜久久 | 污污的视频在线播放 | 黄色一级大片免费看 | 香蕉视频在线网站 | 中国黄色三级 | 亚洲成人在线视频播放 | 国产欧美精品国产国产专区 | 在线免费看a | 亚洲美女爱做色禁图无遮 | 爱爱免费视频 | 亚洲第一视频网 | 女人精aaaa片一级毛片女女 | 黄色录像毛片 | 91久久精品国产一区二区 | 免费看黄色毛片 | 久久精品成人免费网站 | 达达兔欧美午夜国产亚洲 | 亚洲黄色在线视频 | 国产三级网站在线观看 | 九九99九九视频在线观看 | 亚洲一区有码 | 亚洲午夜片 | 人与牲动交bbbbxxxx | 亚洲精品国产第一区二区尤物 | 欧美亚洲在线观看 | 国产乱子精品免费视观看片 | 大片刺激免费播放视频 | 尤物国产在线精品福利一区 | 国产免费一区二区三区免费视频 | 国产精品91av | 中文字幕日本精品一区二区三区 | 日本亚洲乱码中文字幕影院 | 中日韩在线视频 | 欧美三级在线观看视频 |